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如何更好的对优等胎牛血清进行储存与解冻?

发布日期: 2019-01-11
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  生产过程在一个可控的条件下进行。SIP灭菌、无菌过滤和分装作为关键的灭菌过程证实是有效的。产品生产符合质量管理标ISO9001。胎牛血清生产过程遵循IVDD78/79/EC。血清热灭活通过56度水浴保持30分钟完成。热灭活是破坏补体的方法之一,确保细胞不会通过抗体连接而溶解。适用于MRC5、HEPG-2、Hela、3T3、Sf9、CHO、HYBRIDOMA、原代细胞和神经原细胞等的生长。
优等胎牛血清解冻:将血清从冰冻区中取出后(切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀),先置于2~8℃区域中使之融化,然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度(如37℃),但必须注意的是,解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。
如何储存和解冻优等胎牛血清才不会使产品质量受损?
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
优等胎牛血清是从适合人类卫生习惯的农场收集的。有时,也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供体牛血清。在细胞培养中,血清供应了丰富的高分子蛋白,低分子量营养物,疏水载体蛋白和其他体外细胞生长必要的成分如激素和粘附因子。同时,血清可以增加培养基的缓冲能力或中和有毒成分,起到保护细胞的作用。在细胞培养过程中是否选择添加血清,主要根据基础培养基化学成分,培养细胞的类型和培养体系而定。
热灭活的目的是为了去除血清中的补体等对热敏感的物质,但是在优等胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。
研究人员曾对商业胎牛血清中的补体成分进行测定,他们发现胎牛血清中含有的C1、C6仅达成年动物血清的1-3%,而其它补体成分仅有成年动物的5-50%,至于补体的主要成分C3在胎牛血清中则几乎不能检出。通过补体固定实验,我们也在多个不同批次的胎牛血清中获得了相似的结果。
因此,优等胎牛血清在大部分的细胞培养中是不需要灭活的,但在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
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